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[生物技术]
分子生物学实验基本数据
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日期：2007-01-19 10:56:01
点击：165 评论：0
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| Units 1 mg = 10-3 g 1 ug = 10-6 g 1 ng = 10-9 g 1 pg = 10-12 g 1 kb of double stranded DNA = 660 kD 1 kb of single stranded DNA = 330 kD 1 kb of single stranded RNA = 340 kD Average MW of a deoxynucleotide base = 324.5 Daltons Average MW of a deoxyn |
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[生物技术]
Chromatin Immunoprecipitation Assay and PCR
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日期：2007-01-18 01:12:17
点击：215 评论：0
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| Chromatin Preparation Two days before prep, inoculate 5ml media (YP + 2% Raffinose). 30 C 24 hrs. Day before prep, inoculate 300 ml media (YP + 2% Raffinose) with overnight culture. For YP-Raffinose, 300 ul wt will reach OD600=0.4 in ~16 hours. Day |
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[生物技术]
染色质免疫沉淀分析
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日期：2007-01-18 01:00:01
点击：327 评论：0
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| 染色质免疫沉淀分析 （ Chromatin Immunoprecipitation Assay, ChiP ） 真核生物细胞状态是由内源和外源因素共同影响的，所有信号传递途径的终点都是 DNA 。 DNA 通过核 蛋白 复合物组成染色质，染色质是基因调控的一个重要作用位点。转录激活因子和辅助抑制因子的研究 |
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[生物技术]
General Principles of Immunoprecipitation
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日期：2007-01-18 00:48:28
点击：136 评论：0
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| Lysis buffer. The choice of lysis buffer depends on what kind of IP you are doing. RIPA buffer gives the lowest background, but can denature some kinases. It also has the potential to disrupt protein:protein interactions. NP40 buffer (EVF) is less d |
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[生物技术]
Immunoprecipitation and Immune Complex kinase assay
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日期：2007-01-18 00:46:50
点击：110 评论：0
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| 1) In the cold room, wash cells with cold "Tris" (the same stuff used for TC). Spin down the cells if you are working with suspension cells in a low speed swinging bucket centrifuge, resuspend in approximately 1 ml Tris and spin at 2K in a microfuge |
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[生物技术]
Chromatin Immunoprecipitation from Yeast Whole Cell Extracts
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日期：2007-01-18 00:43:59
点击：116 评论：0
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| 1. Crosslink protein DNA complexes in vivo Grow 50ml yeast culture to OD600 0.5-1.0. In fume hood, add 1.4ml 37% fomaldehyde solution to a 50ml conical tube. Fill tube with culture to just below the 50ml line. Incubate at room temperature for 15min. |
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[生物技术]
ChIP Assay Protocol
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日期：2007-01-18 00:40:03
点击：133 评论：0
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| Assemble the following components: Cells, grown in 10 cm dishes Room Temp. PBS Cold PBS Cold Sonication Buffer (1% SDS, 10 mM EDTA, 50 mM Tris-HCl pH 7.5) Prepare sonication buffer as follows: 10 ml of 10% SDS, 2 ml of 500 mM EDTA, 5 ml of 1 M Tris, |
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[生物技术]
目的基因的亚克隆
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日期：2006-12-10 13:59:09
点击：168 评论：0
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| 实验题目 ：目的基因的亚克隆 教师： XXX 实验类型： 综合 学时 ：10(参考) 内容 ： 一、实验目的 1、掌握细菌基因组提取的方法和原理。 2、掌握限制性核酸内切酶处理基因组及其结果分析。 3、掌握基因片段回收的方法。 二、实验原理 细菌基因组的提取：通过碱法或者酶 |
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[生物技术]
重组质粒的转化、筛选和鉴定
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日期：2006-12-10 13:57:28
点击：531 评论：0
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| 实验题目 ：重组质粒的转化、筛选和鉴定 教 师：XXX 实验类型： 综合 学时 ：34(参看) 内容 ： 一、实验目的 1、学习克隆工作中最常用的双酶切； 2、学习将外源基因与质粒连接方法及操作技术； 3、学习氯化钙法制备大肠杆菌感受态细胞的技术； 4、了解细胞转化的概念及 |
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哺乳动物细胞总ＲＮＡ的分离
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日期：2006-12-06 20:50:57
点击：121 评论：0
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| 这一从培养的单层哺乳动物细胞中分离RNA的实验程序系为Favaloro等（1980）所介绍程序的改良。该程序同样适用于从悬浮培养的哺乳动物细胞中或从易于分散成单个细胞的哺乳动物组织中分离RNA。但不适用于从固体组织中提取RNA，因为用这种裂解细胞的方法（在SDS存在的条件 |
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基因芯片技术
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日期：2006-12-06 20:50:00
点击：156 评论：0
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| 关键词 基因芯片杂交检测 随着人类基因组（测序）计划（Humangenomeproject）的逐步实施以及分子生物学相关学科的迅猛发展，越来越多的动植物、微生物基因组序列得以测定，基因序列数据正在以前所未有的速度迅速增长。然而,怎样去研究如此众多基因在生命过程中所担负的 |
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亲和色谱法
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日期：2006-12-06 20:48:03
点击：109 评论：0
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| 一、基本理论 （一）原理 在生物体内，许多大分子AKSJDHFKLSDFHKLSDJ具有与某些相对应的专一分子可逆结合的特性。例如抗原和抗体、酶和底物及辅酶、激素和受体、RNA和其互补的DNA等，都具有这种特性。生物分子之间这种特异的结合能力称为亲和力，根据生物分子间亲和吸 |
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离子交换色谱法
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日期：2006-12-06 20:47:12
点击：148 评论：0
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| Sober和Peterson于1956年首次将离子交换基团结合到纤维素上，制成了离子交换纤维素，成功地应用于蛋白质的分离。从此使生物大分子的分级分离方法取得了迅速的发展。离子交换基团不但可结合到纤维上，还可结合到交联葡聚糖（S-ephadex）和琼脂糖凝胶（Sepharose）上。近 |
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分光光度技术
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日期：2006-12-06 20:46:15
点击：113 评论：0
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| 有色溶液对光线有选择性的吸收作用，不同物质由于其分子结构不同，对不同波长线的吸收能力也不同，因此， 每种物质都具有其特异的吸收光谱 。有些无色溶液，光虽对可见光无吸收作光光度技术吸收用，但所含物质可以吸收特定波长的紫外线或红外线。分光谱来鉴定物质性质 |
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RNA酶活性的控制
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日期：2006-12-06 20:44:50
点击：112 评论：0
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| 为了获得高质量的真核细胞mRNA，必须使用RNA酶的抑制剂或采用下述的破碎细胞和灭活RNA酶同步进行的方法，最大限度地降低细胞破碎过程中所释放的RNA酶的活性。同时，避免偶然引入实验室内其他潜在的痕量RNA酶也很重要。下面列举避免RNA酶法染问题的一些注意事项。大多数 |
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