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Western 不同转膜方法的取舍
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日期：2007-09-23 11:31:06
点击：166 评论：0
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| 转膜: 小分子量的蛋白半干转效果比较好， 大分子量（100KD）以上建议湿转。 具体转膜条件需要多摸一下。30-80KD半干转恒流1mA/cm2，1-1.5h 都可以，大分子湿转100V，2.5h以上应该可以，转完膜丽春红染出的条带比较清楚的话，一般都能有结果。 湿转，Buffer一定要预冷， |
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Western bloting 综述
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日期：2007-09-23 11:29:39
点击：294 评论：0
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| 摘要： 本文主要是针对Western bloting的原理及操作进行了简单的阐述，Western印迹法是利用抗原抗体的免疫反应，先将蛋白通过SDS-PAGE电泳分离开来，然后再利用电场力的作用将胶上的蛋白转移到固相载体（NC膜）上，然后再加抗体形成抗原抗体复合物，利用发光或显色原理 |
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Dry Transfer 干法蛋白转膜
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日期：2007-09-23 11:27:46
点击：74 评论：0
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| Dry Transfer Trans-Bot SD Assembly 1. Prepare the transfer buffer. 2. Following electrophoresis, equilibrate the gels in transfer buffer. Equilibration facilitates the removal of electrophoresis buffer salts and detergents. The length of time requir |
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Western免疫印迹
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日期：2007-09-23 11:26:05
点击：171 评论：0
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| Western免疫印迹（Western Blot）是将蛋白质转移到膜上，然后利用抗体进行检测。对已知表达蛋白，可用相应抗体作为一抗进行检测，对新基因的表达产物，可通过融合部分的抗体检测。 一、原理 与Southern 或Northern杂交方法类似，但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝胶 |
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免疫印迹（Western blotting）
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日期：2007-09-23 11:23:00
点击：234 评论：0
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| 实验题目 ：免疫印迹（Western blotting） 教 师：XXX 实验类型： 综合 学 时 ：16 (参考) 内 容 ： 一、 实验目的 ： 免疫印迹主要用于蛋白质的结构和活性检测等方面，学生掌握与免疫印迹相关的原理和方法，如电泳技术，转膜技术等。 二、 实验原理 ： 蛋白质印迹 (We |
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Western Blot详解－原理
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日期：2007-09-23 11:17:29
点击：283 评论：0
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| Western免疫印迹（Western Blot）是将蛋白质转移到膜上，然后利用 抗体 进行检测。对已知表达蛋白，可用相应 抗体 作为一抗进行检测，对新基因的表达产物，可通过融合部分的 抗体 检测。 原理 与Southern或Northern杂交方法类似，但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝胶 |
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蛋白质双向电泳过程与体会
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日期：2007-08-26 05:35:46
点击：271 评论：0
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| 双向电泳IEF (sigma) IEF（not IPG）/SDS-PAGE最简单的装备推荐如下，适合于没多少money做IPG又想做“热”的所谓蛋白质组的. IEF用Biorad的圆盘电泳槽（不行用国产的吧，不推荐），SDS-PAGE用六一厂的就可以了(推荐六一的，买进口电泳槽的钱留出来测搞出的差异蛋白质的 |
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蛋白质双向电泳过程与体会
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日期：2007-08-26 05:29:05
点击：348 评论：0
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| 五、平板胶的染色 硝酸银染色：（整个操作在摇床上进行） （1） 固定：25ml的冰醋酸，100ml甲醇，125ml 去离子水，60 分钟。 （2） 敏化：75ml甲醇，0.5g硫代硫酸钠（使用之前加入），17g醋酸钠，165ml去离子水，30分钟。 （3） 清洗：用250ml 的去离子水清洗3 次每次5 |
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蛋白质组学入门－－双向电泳篇
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日期：2007-08-26 05:26:36
点击：238 评论：0
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| 1. 重泡胀后的胶可以不用转移到另一个电泳槽，直接跑 2D 的一向吗？ 一般情况下是可以的。但当上样量特别大时，可能会有一部分蛋白质没有被胶条吸收，这样跑完 1D 和 2D 胶后，会有很多横向条纹。所以在这种情况下，最好在重泡胀后，将胶条转移到另外一个电泳漕中进行电 |
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双向电泳常见问题
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日期：2007-08-26 05:25:16
点击：220 评论：0
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| 1. 重泡胀后的胶可以不用转移到另一个电泳槽，直接跑 2D 的一向吗？ 一般情况下是可以的。但当上样量特别大时，可能会有一部分蛋白质没有被胶条吸收，这样跑完 1D 和 2D 胶后，会有很多横向条纹。所以在这种情况下，最好在重泡胀后，将胶条转移到另外一个电泳漕中进行电 |
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IEF/SDS-PAGE双向电泳
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日期：2007-08-26 05:22:13
点击：181 评论：0
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| 1975年O′Farrall等人根据不同组份之间的等电点差异和分子量差异建立了IEF/SD S-PAGE双向电泳。其中IEF电泳（管柱状）为第一向，SDS-PAGE为第二向（平板）。在进行第一向IEF电泳时，电泳体系中应加入高浓度尿素、适量非离子型去污剂NP-40。蛋白质样品中除含有这两种物质 |
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双向电泳
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日期：2007-08-26 05:18:59
点击：178 评论：0
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| 蛋白质组研究的发展以双向电泳技术作为核心. 双向电泳由O’Farrell’s于1975年首次建立并成功地分离约1 000个E.coli蛋白，并表明蛋白质谱不是稳定的，而是随环境而变化. 双向电泳原理简明，第一向进行等电聚焦，蛋白质沿pH梯度分离，至各自的等电点；随后，再沿垂直的方 |
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Western Blot试验宝典
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日期：2007-08-05 00:31:05
点击：995 评论：0
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| Western Blot试验宝典 Western Blot试验宝典 Western印迹要想做的好，当然每个步骤都不能马虎 一．配胶 这些小孔的孔径随 “双丙烯酰胺～丙烯酰胺” 比率的增加而变小，比率接近 1：20 时孔径达到最小值。SDS聚丙烯酰胺凝胶大多按“双丙烯酰胺～丙烯酰胺”为1：29 配制 |
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WESTERN BLOT PROTOCOLS
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日期：2007-08-05 00:28:51
点击：331 评论：0
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| WESTERN BLOT PROTOCOLS 蛋白提取与溶液配制 溶液配制： RIPA Lysis Buffer ( 1L ) Triton-X100 10ml SDS 1g NaCI 8.77g Tris HCI 2.42g Deoxycholatic Acid 5g 四种抑制剂： 1、 Aprotinin （抑肽酶） 2、 PMSF 3、 Pepstation 4、 Leupeptin （亮抑蛋白酶肽） 提取方 |
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Western Blot 原理和操作方法（详细）
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日期：2007-08-04 23:34:04
点击：1502 评论：0
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| Western Blot 原理和操作方法（详细） $5V 工作原理 Y|-_2IU 蛋白质的电泳分离是重要的生物化学分离纯化技术之一,电泳是指带电粒子在电场作用下,向着与其电荷相反的电极移动的现象.根据所采用的支持物不同,有琼脂糖凝胶电泳,淀粉凝胶电泳,聚丙烯酰胺凝胶电泳等.其中,聚 |
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