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[核酸技术]
PCR/RT-PCR指南---PCR应用(9)
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日期：2007-02-09 08:32:08
点击：140 评论：0
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| 多重PCR 在多重PCR中，同时使用多对引物扩增几个不同的位点。这种复杂的PCR一般会导致低产量，而且需要高浓度的Mg2+。如果没有正确优化，容易出现假阳性。Platinum Taq DNA聚合酶经改良，可以适应广谱浓度的Mg2+，从而提高多组反应成功的可能性（ 图27 ）。 图27. 对于 |
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[核酸技术]
PCR/RT-PCR指南---PCR产物克隆(10)
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日期：2007-02-09 08:30:22
点击：186 评论：0
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| PCR克隆主要有TA克隆法, 限制性酶切与连接法，杂交法和近期开发出来的特异性重组法等。 但因为TA克隆法操作最简单，快速和高效的原因，成为Taq聚合酶PCR产物的最佳克隆方法。TA克隆法由Invitrogen发明，并拥有全球TA Cloning商标的专利权。 TA克隆方法（Original TA Cl |
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[核酸技术]
PCR/RT-PCR指南---PCR扩增产物表达的快速方法(11)
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日期：2007-02-09 08:28:01
点击：153 评论：0
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| 使用Directional TOPO表达试剂盒把克隆基因转入到表达载体，将节省你大量时间。这些试剂盒具有快速，高效的特点，Directional TOPO克隆技术结合高效的pET和pcDNA3.1载体中，使你从PCR中立即得到表达结果。 成熟的技术 Directional TOPO克隆技术将平整末端的单向克隆的P |
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[核酸技术]
PCR/RT-PCR指南---疑难解答(12)
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日期：2007-02-09 08:26:41
点击：99 评论：0
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| 问 题 可能原因 建议解决方法 RT-PCR灵敏度：在琼脂糖凝胶分析中看到少量或没有RT-PCR产物 RNA被降解 在用来验证完整性之前先在变性胶上分析RNA 使用良好的无污染技术分离RNA 在将组织从动物体取出后立刻处理 在100％甲酰胺中储存RNA如果使用胎盘RNase抑制剂，不要加热 |
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[核酸技术]
PCR/RT-PCR指南---相关产品(13)
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日期：2007-02-09 08:25:32
点击：89 评论：0
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| PCR聚合酶的比较 产 品 产物长度 产 量 特异性 忠实性 Taq DNA Polymerase ＜5kb ● ● ● Taq PCRx DNA Polymerase ＜5kb ● ●* ● PCR SuperMix ＜5kb ● ● ● Platinum Taq DNA Polymerase ＜5kb ●● ●● ● Platinum Taq PCRx DNA Polymerase ＜5kb ●● ●● |
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[核酸技术]
定量PCR的测定原理和方法
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日期：2007-02-09 08:22:16
点击：210 评论：0
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| 尽管PCR目前在临床上的应用存在争议，由于试剂，设备以及人员素质等原因其结果也不尽如人意，但作为分子生物学基本技术之一，究其技术本身是成熟的。多年以来PCR技术只作为一种高灵敏的定性技术而被应用，既制约了PCR质量控制的建立，又大大制约了PCR技术的应用，近年来 |
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[核酸技术]
实时荧光PCR定量的数学模型
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日期：2007-02-09 08:19:55
点击：145 评论：0
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| 检验技术定量的数学模型都是寻找检测信号与检测浓度的数学关系。由于PCR的检测方式和传统检测不同，PCR最终检测出的信号的终产物的信号，而要检测的是初始浓度，因此PCR定量的数学模型较为复杂。 首先，终产物的浓度与荧光信号的关系，与一般荧光定量一致，即终产物浓 |
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[核酸技术]
定量PCR常见问题解答
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日期：2007-02-09 08:16:54
点击：125 评论：0
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| 1. 定量PCR仪的开关机顺序是怎样的？ 按照正确的开关机顺序操作，有助于延长仪器的使用寿命，减少仪器出故障的频率。开机顺序：先开电脑，待电脑完全启动后再开启定量PCR仪主机，等主机面板上的绿灯亮后即可打开定量PCR的收集软件，进行实验。关机顺序：确认实验已经结 |
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[核酸技术]
实时荧光定量PCR技术及其应用
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日期：2007-02-08 09:40:06
点击：154 评论：0
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| 荧光定量PCR仪技术及其在医学中的应用 Fluorescence quantitative PCR and its application to medicine [医疗卫生装备 Chinese Medical Equipment Journal] 谢国明 , 刘向国 实时荧光定量PCR的应用和进展 The Application and Development of Real-time Fluorescent Q |
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[核酸技术]
Roche公司推出实时定量PCR的检测产品
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日期：2007-02-08 09:35:32
点击：113 评论：0
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| Roche公司最新研发了FastStart TaqMan探针 试剂 盒。 FastStart TaqMan探针试剂盒和FastStart SYBR绿试剂盒混合物最适合用于大多数实时 PC R设备，除了LightCycler2.0设备。具有两种形式，一种包含ROX参考染料，另一种则不包含。联合使用实时PCR设备、合适的PCR引物以 |
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[核酸技术]
实时定量PCR技术检测乙型及丙型肝炎病毒
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日期：2007-02-08 09:30:21
点击：124 评论：0
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| 前言： 感染性疾病的最大特点是存在病原体。病原的检测在感染病学的诊断中占有极其重要的地位。聚合酶链反应（PolymeraseChainreactionPCR）是体外扩增特异性DNA或RNA片段的一种技术，通过PCR的扩增，样品中的靶DNA或RNA可以成千上万甚至百万倍的增加。上个世纪的90年 |
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[核酸技术]
定量PCR Taqman探针试剂之选
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日期：2007-02-08 09:28:00
点击：154 评论：0
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| 由于ABI公司在定量PCR领域的领导地位和在推广定量 PCR技术上的贡献，Taqman探针可以说是当下荧光定量PCR中使用最多最广的方法之一，特别是在临床疾病检测上。我们大致可将产品分为2大类，一是已经带有标记探针的特定基因的定量PCR试剂盒，最常见的是疾病/病原检测相关 |
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[核酸技术]
定量PCR 选择二：荧光探针与荧光引物
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日期：2007-02-08 09:24:26
点击：268 评论：0
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| 我们前面比较详细地介绍了荧光染料法做定量PCR的有关技术和产品，显然，作为定量PCR的初期阶段的荧光染料法还是有局限性的，比如，由于染料不能区分特异性PCR产物和引物二聚体等非特异产物，也不能区分不同探针，所以检测的特异性始终不如后来出现的探针法； 需要在 PC |
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[核酸技术]
定量PCR Taqman探针设计要领[初级篇]
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日期：2007-02-08 09:18:13
点击：187 评论：0
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| 自90年代Taqman探针诞生以来，虽然荧光探针（引物）不断有新的技术出现，但是作为一种经典的定量PCR技术，Taqman探针技术仍然是许多实验研究人员进行定量检测的首选，这主要是因为相对于SYBR荧光染料，Taqman探针具有序列特异性，只结合到互补区，而且荧光信号与扩增的 |
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[核酸技术]
定量PCR Taqman探针的应用[高级篇]
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日期：2007-02-08 09:08:12
点击：219 评论：0
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| Taqman探针虽然只发展了短短的几十年，但是无论在技术上还是在应用上都有了长足的发展，尤其是配合着细胞生物学，病理学等方面的发展，应用领域有了很大的延伸。 Taqman定量应用可以分为几个层次，第一个层次自然就是应用到临床检测，微生物检测和食品检测等方面， 第 |
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