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基因分离克隆的方法
  日期:2007-08-29 11:56:52 点击:262 评论:0
1 基因芯片技术分离目的基因 生物芯片是高密度固定在固相支持介质上的生物信息分子的微列阵。列阵中每个分子的序列及位置都是已知的,并按预先设定好的顺序点阵。基因芯片是生物芯片的一种,其上固定的是核算类物质,主要用于DNA、RNA分析。分为DNA芯片和微点阵两种。
Rt-PCR实验步骤
  日期:2007-07-12 07:54:33 点击:242 评论:0
一、实验器具与材料: 1、移液枪:1ml、200μl、20μl、10μl、2μl 2、吸头:1ml、200μl、20μl 3、匀浆管:5ml 4、吸头台:放置1ml吸头的一个,放置20μl吸头的一个 5、EP管:1.5ml、0.2ml、100μl 6、试剂瓶:2个60ml的棕色试剂瓶(广口,带盖) 1个125ml的白色试
PCR文献库常用检索用词
  日期:2007-06-20 10:15:40 点击:124 评论:0
PCR文献库常用检索用词 来源于Medline 光盘数据库索引系统及词表系统提供的检索标识 与 PCR 技术相关的医学主题 如下: 简 称 全 称 中 文 译 名 PCR Polymerase Chain Reaction 聚合酶链反应 PCR- Polymerase Chain Reaction- 聚合酶链反应/ PCR-AIDED Polymerase Cha
Primer Design:Manual and Automated Primer Design for SEQ and PHY Gaps
  日期:2007-06-20 09:27:21 点击:90 评论:0
General Primer Design Guidelines -Note the 5’-3’ direction of the contig. -Locate primers 100 to 200 bp from the feature. -Pick primer from ≥ 2x high quality sequence coverage. -GC Clamp -Avoid runs of identical nucleotides (e.g. ATCGA CCCCC TAGA
PCR Primer Design
  日期:2007-06-20 09:00:35 点击:209 评论:0
Vinay K. Singh and Anil Kumar Bioinformatics Sub-centre, School of Biotechnology, Devi Ahilya University, Khandwa Road, Indore 452 017 MP, India Abstract To make PCR a specific, efficient and cost effective tool for researchers and clinicians the mo
Real-time PCR实验注意事项
  日期:2007-06-20 08:39:44 点击:269 评论:0
实验中的一些好习惯 加入试剂之前,把它混匀一下,以免放置时间长了浓度不均 移液枪用完之后要归到最大计量的位置,防止久而久之弹簧失去弹性 一定要记着关水浴箱,切记切记 多和大家讨论,同时多关注别人讨论的经验,这几乎是最快提高的捷径了 所有的试剂都自己配,出了
PCR的基本原理
  日期:2007-06-20 08:31:29 点击:1240 评论:0
1.基本要素和扩增原理 基本要素与DNA复制的基本要素是一致的。待拷贝的 DNA 称为模板,它可以是双链 DNA 也可是单链DNA,最后扩增得到的产物是双链状态的。引物是 DNA 复制的先锋,就象结晶过程中的晶核,引导 DNA 的合成。在 PCR 扩增中一般使用合成的寡核苷酸作引物
Real-time PCR实验注意事项
  日期:2007-06-20 08:26:28 点击:219 评论:0
实验中的一些好习惯 加入试剂之前,把它混匀一下,以免放置时间长了浓度不均 移液枪用完之后要归到最大计量的位置,防止久而久之弹簧失去弹性 一定要记着关水浴箱,切记切记 多和大家讨论,同时多关注别人讨论的经验,这几乎是最快提高的捷径了 所有的试剂都自己配,出了
建立PCR实验室的基本条件
  日期:2007-06-20 08:24:38 点击:258 评论:0
临床基因扩增实验室采用PCR技术用于临床基因诊断,由于PCR技术对所检测的核酸模板进行大量扩增,容易出现实验室污染导致临床检测标本假阳性结果;另外由于PCR技术要求高、影响因素多(特别是RNA标本),实验过程处理不当易导致核酸模板无扩增现象,导致临床标本假阴性结
Equipment And Reagents For Real-Time PCR
  日期:2007-06-20 08:19:37 点击:66 评论:0
In September 1993 Higuchi et al. published a report in the journal Biotechnology (NY). Titled “Kinetic PCR analysis: real-time monitoring of DNA amplification reactions,” the paper described the technique that would come to be known as Real-Time P
TaqMan PCR以及ABI-7700的简单介绍
  日期:2007-06-20 08:17:37 点击:126 评论:0
ABI PRISM 7700 Sequence Detection System Integrates a PCR-based assay with laser scanning technology to excite fluorescent dyes present in the specially designed TaqMan probes. It is a fully integrated system for real-time detection of PCR. The syste
real-time PCR 常用探针和仪器
  日期:2007-06-20 08:15:48 点击:148 评论:0
1.SYBR Green I: 一种DNA结合染料,能非特异性地与双链DNA结合,结合后发出荧光,价格便宜,但因无特异性,易受到非特异性扩增和引物二聚体地的影响,是定量结果不可靠。可用融解曲线分析区分特异性和非特异性扩增,引物的设计和反应条件的优化对消除非特异性荧光有
竞争定量PCR
  日期:2007-06-20 08:13:41 点击:140 评论:0
竞争定量PCR是先构建一个与靶基因相同的扩增效率和引物结合位点仅探针结合位点不同的内标,在同一反应管内,靶基因和内标物和引物(primer)竞争性结合,进行同步扩增,由于竞争作用,当一种模板量逐渐增加时,另一种模板的扩增产物相对逐渐减少,但两种扩增产物的比值
Real-time PCR problems-Molecular Biology
  日期:2007-06-20 08:07:51 点击:71 评论:0
hi all, i have recently started to use an iCycler for setting up my real-time pcr systems and have encountered problems when trying to run a serial dilution of a template to evaluate my reaction efficiency. what happens is, i'll make up for example 5
QRT-PCR result analysis-Real-Time PCR
  日期:2007-06-20 08:01:46 点击:63 评论:0
Hello, I would like to know how people usually normalize the amount RNA they use for a quantitative real-time RT-PCR. I have used two different ways as reported in papers, but they gave me two totally different results-!! One method uses the total RN
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