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[PCR]
PCR技术（3）：PCR反应模板的制备
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日期：2006-11-22 16:09:41
点击：133 评论：0
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| PCR反应的关键因素主要有引物的选择与设计，酶的质量.模板的制备，在前二者都稳定可行的情况下，PCR模板的制备尤为重要.模板处理方法的选择及操作人员的基本技能，决定分离模板核酸(DNA或RNA)的质和量及PCR的成败.而提高模板核酸质量的关键是除去杂质(蛋白质、酶、脂肪 |
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[PCR]
PCR技术（二）：Taq DNA聚合酶
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日期：2006-11-22 16:08:48
点击：152 评论：0
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| TaqDNA聚合酶是从一种水生栖热菌(Thermusaquaticus)yT1株分离提取的.yT是一种嗜热真菌，能在70～75℃生长.该菌是1969年从美国黄石国家森林公园火山温泉中分离的. (一)酶活性与热稳定性 该酶基因全长2496个碱基，编码832个氨基酸，酶蛋白分子为94KDa.其比活性为200000单 |
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[PCR]
PCR常见问题及回答
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日期：2006-11-22 16:01:10
点击：415 评论：0
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| 一、RT-PCR 1.cDNA产量的很低 可能的原因： *RNA模板质量低 *对mRNA浓度估计过高 *反应体系中存在反转录酶抑制剂或反转录酶量不足 *同位素磷32过期 *反应体积过大，不应超过50μl 2.扩增产物在电泳分析时没有条带或条带很浅 *最常见的原因在于您的反应体系是PCR的反应 |
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[PCR]
PCR反应体系与反应条件
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日期：2006-11-22 14:51:18
点击：484 评论：0
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| 标准的PCR反应体系： 10×扩增缓冲液10ul 4种dNTP混合物各200umol/L 引物各10～100pmol 模板DNA0.1～2ug TaqDNA聚合酶2.5u Mg2+1.5mmol/L 加双或三蒸水至100ul PCR反应五要素：参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物：引物是PCR特异性反应的关 |
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[PCR]
影响PCR的主要因素
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日期：2006-11-22 14:43:25
点击：1409 评论：0
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| PCR技术必须有人工合成的合理引物和提取的样品DNA，然后才进行自动热循环，最后进行产物鉴定与分析。引物设计与合成目前只能在少数技术力量较强的研究院、所进行，临床应用只需购买PCR检测试剂盒就可开展工作，PCR自动热循环中影响因素很多，对不同的DNA样品，PCR反应 |
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[PCR]
PCR技术（一）：PCR技术概论
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日期：2006-11-22 14:19:45
点击：415 评论：0
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| PCR技术简史 PCR技术的基本原理 PCR反应体系与反应条件 PCR反应特点 PCR扩增产物的分析 聚合酶链反应(PolymeraseChainReaction,PCR)是80年代中期发展起来的体外核酸扩增技术。它具有特异、敏感、产率高、快速、简便、重复性好、易自动化等突出优点；能在一个试管内将所 |
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