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比较详细的PCR
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日期：2006-12-07 10:22:03
点击：105 评论：0
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| 1.PCR反应的最适条件 4．1TaqDNA聚合酶 在早期进行的PCR反应中，使用的是大肠杆菌DNA聚合酶1的大片段，，即Klenow片段。也曾有人用噬菌体T4DNA聚合酶。这两种酶的共同弱点是对热不稳定性，DNA合成反应只能在370C进行。PCR时每一循环的解链温度都在90C以上进行，故在每 |
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PCR常见问题集锦
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日期：2006-12-07 10:20:35
点击：76 评论：0
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| PCR产物的电泳检测时间 一般为48h以内，有些最好于当日电泳检测，大于48h后带型不规则甚致消失。 假阴性，不出现扩增条带 PCR反应的关键环节有①模板核酸的制备，②引物的质量与特异性，③酶的质量及，④PCR循环条件。寻找原因亦应针对上述环节进行分析研究。 模板：① |
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DNA 芯片的制备与应用
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日期：2006-12-07 10:18:33
点击：132 评论：0
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| DNA芯片的制备与应用 DNA芯片的出现，是生物技术领域的一次革命，虽然现在无法预知它带给我们的变化。但由于它在人类 基因组 计划，基因表达和药物筛选等方面的潜在用途。目前已有越来越多的公司和研究机构加入到DNA芯片的设计与开发。DNA芯片技术集成了集成电路制造， |
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Southern杂交
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日期：2006-12-07 09:56:57
点击：323 评论：0
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| Southern杂交是分子生物学的经典实验方法。其基本原理是将待检测的DNA样品固定在固相载体上，与标记的核酸探针进行杂交，在与探针有同源序列的固相DNA的位置上显示出杂交信号。通过Southern杂交可以判断被检测的DNA样品中是否有与探针同源的片段以及该片段的长度。该项 |
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[PCR]
PCR引物设计原则
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日期：2006-12-04 08:44:23
点击：437 评论：0
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| PCR引物设计原则 关键词 ： PCR PCR引物设计的目的是为了找到一对合适的核苷酸片段，使其能有效地扩增模板DNA序列。因此，引物的优劣直接关系到PCR的特异性与成功与否。要设计引物首先要找到DNA序列的保守区。同时应预测将要扩增的片段单链是否形成二级结构。如这个区 |
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引物设计总结
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日期：2006-12-03 04:12:13
点击：320 评论：0
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| 寡核苷酸的优化设计 郑仲承 (中国科学院上海生命科学院生物化学和细胞生物学研究所，上海200031) 在核酸分子杂交、DNA序列测定和通过PCR放大DNA片段等实验中，都需要使用寡核苷酸作为探针或引物，而对这些反应的质量起最重要影响作用的，就是这些寡核苷酸探针或引物。 |
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实时荧光定量PCR原理
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日期：2006-12-02 02:18:42
点击：1149 评论：0
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| 实时荧光定量PCR 原理实时荧光定量PCR原理 实时荧光定量 PCR 技术于 1996 年由美国 AppliedBiosystems 公司推出，该技术不仅实现了 PCR 从定性到定量的飞跃，而且与常规 PCR 相比，具有特异性更强、有效解决 PCR 污染问题、自动化程度高等特点，目前已得到广泛应用。本 |
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RNAi 和DNA芯片的结合
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日期：2006-12-01 14:18:58
点击：146 评论：0
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| 管研究基因组的技术已经相当先进，科学家们还在致力不断的创新和改造技术使之更为强大。现代分子生物学两个划时代的技术—— DNA 芯片和 RNAi(RNA-mediatedinterference) ，正在掀开生物医药的新篇章。 RNAi ，通过双链 RNA 引发目标靶基因沉默的一项强大的新技术，专一 |
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PCR在病毒感染的基因诊断
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日期：2006-11-26 14:37:13
点击：80 评论：0
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| 组织中总RNA的提取 ↓ 利用反转录酶合成cDNA ↓ PCR反应： 反应液组织：反应缓冲液 模板（上述合成的cDNA） 底物（dATP,dGTP,dCTP,dTTP） 引物（爱滋病病毒特异性引物） TaqDNA聚合酶 50μl 循环：95℃，30sec（变性） ↓ 55℃，1min（退火）30循环 ↓ 72℃，1min（聚 |
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PCR实用技巧
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日期：2006-11-26 14:31:36
点击：93 评论：0
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| 增加PCR的特异性： 1.primersdesign 这是最重要的一步。理想的，只同目的序列两侧的单一序列而非其他序列退火的引物要符合下面的一些条件 a.足够长,18-24bp,以保证特异性.当然不是说越长越好,太长的引物同样会降低特异性,并且降低产量 b.GC%40%~~~~60%c.5'端和中间序列 |
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[PCR]
免疫荧光技术
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日期：2006-11-22 20:05:45
点击：465 评论：0
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| 直接免疫荧光法测抗原 基本原理 将荧光素标记在相应的抗体上，直接与相应抗原反应。其优点是方法简便、特异性高，非特异性荧光染色少。缺点是敏感性偏低；而且每检查一种抗原就需要制备一种荧光抗体。此法常用于细菌、病毒等微生物的快速检查和肾炎活检、皮肤活检的免 |
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[PCR]
琼脂糖凝胶电泳回收PCR产物
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日期：2006-11-22 19:39:02
点击：701 评论：0
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| 一．原理 DNA片断的分离与回收是基因工程操作中的一项重要技术，例如可收集特定酶切片断用于克隆或制备探针，回收PCR产物用于再次鉴定等。回收实验中两个最重要的技术指标是纯度和回收率：前者未达标时会严重影响以后的酶切、连接、标记等酶参与的反应；后者不 理想时 |
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[PCR]
PCR产物的直接纯化
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日期：2006-11-22 19:36:04
点击：355 评论：0
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| 一．原理 PCR产物一般都含有过量的引物、TaqDNA酶及dNTP，这些成分的存在将直接影响到后续的酶切、双脱氧PCR测序反应等过程，因此有必要除去。目前核酸纯化的方法有很多，商用化试剂盒的出现使得DNA的纯化过程变得更加简便快捷。本实验中，BufferPCR-A促使大于100bp的DN |
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[PCR]
Rt-PCR实验步骤
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日期：2006-11-22 19:26:28
点击：2477 评论：0
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| 一、实验器具与材料： 1、移液枪：1ml、200μl、20μl、10μl、2μl 2、吸头：1ml、200μl、20μl 3、匀浆管：5ml 4、吸头台：放置1ml吸头的一个，放置20μl吸头的一个 5、EP管：1.5ml、0.2ml、100μl 6、试剂瓶：2个60ml的棕色试剂瓶（广口，带盖） 1个125ml的白色试 |
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[PCR]
PCR法检测乙肝病毒
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日期：2006-11-22 19:24:20
点击：256 评论：0
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| 多聚酶链反应(polymerasechainreaction，PCR)是一种模拟天然DNA复制过程，在体外扩增特异性DNA（或RNA）片段的新技术。本实验是将待检双链DNA经94℃高温变性成单链作模板，然后加入一对人工合成的寡核苷酸引物，引物分别与待扩增DNA片段的两端互补，经55℃低温退火，引 |
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