好的内切酶
不好的内切酶
· 活性高· 品质稳定,保存期长· 无其它核酸酶污染(包括外切酶污染)
·活性不高·保存一段时间后活性迅速下降·有其它核酸酶的污染(包括外切酶污染)
质粒DNA
酶切反应
好的内切酶切割
不好的内切酶切割
完整的DNA片段
连接
少量的外切酶损坏DNA末端 不完整的DNA片段+1、2个dNTP
成功连接,克隆并表达
连接失败,克隆不成功,无法表达或产物不正确
NEB EcoRV: Survival rate=49/50
Company T EcoRV: Survival rate=3/50
看看,不同质量的内切酶,实验结果大不相同!