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siRNA的转染方法
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日期：2006-12-16 08:55:28
点击：197 评论：0
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| 将制备好的siRNA，siRNA表达载体或表达框架转导至真核细胞中的方法主要有以下几种： 1.磷酸钙共沉淀 将氯化钙，RNA(或DNA)和磷酸缓冲液混合，沉淀形成包含DNA且极小的不溶的磷酸钙颗粒。磷酸钙-DNA复合物粘附到细胞膜并通过胞饮进入目的细胞的细胞质。沉淀物的大小和质 |
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酵母双杂交实验常见疑难解答
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日期：2006-12-16 08:38:22
点击：123 评论：0
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| 问：如果诱饵蛋白对酵母细胞是有毒的，该怎么办？ 答：在有些情况下，在液体培养基中培养不好的菌珠可以在固体培养基上生长得很好。重悬克隆于1ml的SD/–Trp，接着将重悬液平铺于5个100-mm的SD/–Trp平板。在30℃下温浴，直至平板上的克隆互相粘在一起。用5ml0.5XYPDA |
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基因的图位克隆
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日期：2006-12-11 11:54:22
点击：426 评论：0
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| 图位 克隆 (Ｍａｐ-ｂａｓｅｄｃｌｏｎｉｎｇ)又称定位 克隆 (ｐｏｓｉｔｉｏｎａｌｃｌｏｎｉｎｇ),1986年首先由剑桥大学的Ａｌａｎｃｏｕｌｓｏｎ提出,用该方法分离基因是根据目的基因在染色体上的位置进行的,无需预先知道基因的ＤＮＡ顺序,也无需预先知道其表达产物 |
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应用细胞融合技术制备染色体提前凝集标本
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日期：2006-12-11 11:51:56
点击：120 评论：0
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| 一、原理 两个或两个以上的同种或不同种细胞可以在诱导物的作用下融合成一个细胞。 七十年代初，由于发现M期细胞内有某种促进染色体凝集因子，它无种属特异性，所以在细胞融合和染色体技术的基础上，建立了制备染色体提前凝集标本的方法。即让M期细胞与间期（I期）细胞 |
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定位候选克隆
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日期：2006-12-11 11:33:29
点击：152 评论：0
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| 当前，人类 基因组 研究的重心正在由“结构”向“功能”转移，一个以 基因组 功能研究为主要内容的所谓“后 基因组 时代”(post-genomics)，也即功能 基因组 (functionalgenomics)时代，即将到来。如何获取基因的功能信息，即与人类重大疾病和重要生理功能相关的基因信 |
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目的基因的亚克隆
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日期：2006-12-10 13:59:09
点击：168 评论：0
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| 实验题目 ：目的基因的亚克隆 教师： XXX 实验类型： 综合 学时 ：10(参考) 内容 ： 一、实验目的 1、掌握细菌基因组提取的方法和原理。 2、掌握限制性核酸内切酶处理基因组及其结果分析。 3、掌握基因片段回收的方法。 二、实验原理 细菌基因组的提取：通过碱法或者酶 |
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重组质粒的转化、筛选和鉴定
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日期：2006-12-10 13:57:28
点击：531 评论：0
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| 实验题目 ：重组质粒的转化、筛选和鉴定 教 师：XXX 实验类型： 综合 学时 ：34(参看) 内容 ： 一、实验目的 1、学习克隆工作中最常用的双酶切； 2、学习将外源基因与质粒连接方法及操作技术； 3、学习氯化钙法制备大肠杆菌感受态细胞的技术； 4、了解细胞转化的概念及 |
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什么是克隆技术
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日期：2006-12-10 10:53:46
点击：1862 评论：0
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| 1997年2月22日，英国罗斯林研究所的科学家维尔穆特等人宣布用体细胞克隆绵羊获得成功，在世界上引起巨大震动。一时间，克隆绵羊“多利”成为动物界最耀眼的“明星”，其“咩咩”的叫声迅速响遍全球。 “克卤是英文单词“Clone”的音译，其本身的含义是无性繁殖，即由同 |
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PCR专题
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日期：2006-12-02 01:29:32
点击：1089 评论：0
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酶联免疫吸附试验及其应用
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日期：2006-12-08 08:48:33
点击：362 评论：0
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| 一、前言 近二十几年来，免疫学分析方法发展很快，特别是在使用标记了的抗原和抗体的分析技术以后，使原来许多经典的分析方法在敏感性和特异性方面都不能相比。继50年代的免疫荧光（IFA）和60年代的放射免疫(RIA)分析技术之后，在70年代初期又建立了用酶来标记抗原或抗 |
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[蛋白技术]
原核表达操作步骤及注意事项
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日期：2006-12-07 10:12:47
点击：304 评论：0
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| 将 克隆 化基因插入合适载体后导入大肠杆菌用于表达大量蛋白质的方法一般称为原核表达。这种方法在蛋白纯化、定位及功能分析等方面都有应用。大肠杆菌用于表达重组蛋白有以下特点： 易于生长和控制；用于细菌培养的材料不及哺乳动物细胞系统的材料昂贵；有各种各样的大 |
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染色质免疫沉淀新技术开启未来之门
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日期：2006-12-07 10:10:41
点击：123 评论：0
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| 英国的研究者已经设计出了一种有关染色质免疫沉淀反应的方法，它仅仅需要一百个如此少量的细胞，为我们开启了一扇大门，以便通往有关原始细胞和胚胎的表观遗传信息这一领域的研究。 在过去十年中，染色质免疫沉淀反应(ChIP)已经成了进行表观遗传信息研究的主要方法。这 |
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E玫瑰花环试验
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日期：2006-12-07 10:07:17
点击：142 评论：0
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| 基本原理 玫瑰花环试验是体外检测人和动物细胞免疫功能的一种方法。 E —玫瑰花环试验是 T 淋巴细胞计数的一种重要方法。由于人和动物的 T 淋巴细胞表面有红细胞受体，因此红细胞可以粘附到 T 淋巴细胞的周围而形成玫瑰花样的细胞团。在红细胞中，以绵羊红细胞最为常用 |
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混合型玫瑰花环试验
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日期：2006-12-07 10:04:33
点击：88 评论：0
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| 原理 混合型玫瑰花环的方法是既应用补体致敏的家鸽红细胞（ PRBC ）作为 B —细胞的标志，同时又应用绵羊红细胞（ SRBC ）作为 T —细胞的标志，在一张玻片上同时检测 T 、 B 淋巴细胞。 操作方法 1 ．鸽翼下静脉采血，加等量阿氏液，保存于 4 ℃ ，可用 2 周。 2 ．以 |
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亲和免疫组织化学技术的基本原理
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日期：2006-12-07 09:50:49
点击：259 评论：0
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| 一、卵蛋白和生物素免疫染色 很早以前，人们就注意到给动物喂饲大量鸡蛋白时，可引起明显的“维生素H缺乏症”。经研究发现，在鸡蛋白中含有一种碱性蛋白质，分子量约为68，000，属于糖蛋白一类。当时命名为卵白素（Avidin）。卵白素具有4个由128个氨基酸组成的相同亚基 |
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