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RNA提取流程
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日期：2006-11-23 16:32:17
点击：101 评论：0
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| 总RNA（totalRNA）和信使RNA(mRNA)的抽提（自己的总结） 1、实验目的 提取人体细胞的总RNA和mRNA。 2、本实验所需试剂 1）、CNE-2细胞及培养细胞的一系列条件， 2）、PBS缓冲液，TRIZOL试剂， 3）、DEPC处理过的水、大、中、小Tip及1.5mlEP管, 4）、新的氯仿、异丙醇和 |
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真核细胞DNA的制备与定量
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日期：2006-11-23 16:31:48
点击：73 评论：0
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| 制备基因组DNA是进行基因结构和功能研究的重要步骤，通常要求得到的片段的长度不小于100-200kb。在DNA提取过程中应尽量避免使DNA断裂和降解的各种因素，以保证DNA的完整性，为后续的实验打下基矗一般真核细胞基因组DNA有107-9bp，可以从新鲜组织、培养细胞或低温保存的 |
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苏云金杆菌的部分生化试验鉴定
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日期：2006-11-23 16:17:49
点击：81 评论：0
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| 一、目的要求： 应用生物化学技术对昆虫病原细菌进行鉴定，乃是一种十分简便快速的方法，鉴定苏云金杆菌的生化指标是：V、P反应，卵磷脂酶，蛋白水解，吐温酶，水杨素，七叶灵、蔗糖、甘露糖、表膜、酶、淀粉、几丁质酶、精氨酸脱羟酶等。本实验是通过简单的生化测定来 |
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λ噬菌体DNA提取
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日期：2006-11-23 16:17:13
点击：79 评论：0
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| λ噬菌体是最早使用的克隆载体，λ噬菌体的基因组是一长度约为50kb的双链DNA分子，它在宿主细胞有两种生活途径，其一是裂解生长，环状DNA分子在细胞内多次复制，合成大量噬菌体基因产物，装配成噬菌体颗粒，裂解宿主菌再进行下一次感染；其二是溶源性生长，即感染细胞内 |
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真核细胞DNA的制备与定量
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日期：2006-11-23 16:16:56
点击：56 评论：0
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| 制备基因组DNA是进行基因结构和功能研究的重要步骤，通常要求得到的片段的长度不小于100-200kb。在DNA提取过程中应尽量避免使DNA断裂和降解的各种因素，以保证DNA的完整性，为后续的实验打下基矗一般真核细胞基因组DNA有107-9bp，可以从新鲜组织、培养细胞或低温保存的 |
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动植物组织mRNA提取
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日期：2006-11-23 16:16:36
点击：59 评论：0
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| 一、材料 水稻叶片或小鼠肝组织。 二、设备 研钵，冷冻台式高速离心机，低温冰箱，冷冻真空干燥器，紫外检测仪，电泳仪，电泳槽。 三、试剂 1、无RNA酶灭菌水：用将高温烘烤的玻璃瓶（180℃2小时）装蒸馏水，然后加入0.01%的DEPC（体积/体积），处理过夜后高压灭菌。 2 |
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酶切反应详解
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日期：2006-11-23 16:16:19
点击：132 评论：0
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| 一、建立一个标准的酶切反应 目前大多数研究者遵循一条规则，即10个单位的内切酶可以切割1μg不同来源和纯度的DNA。通常，一个50μl的反应体系中，1μl的酶在1XNEBuffer终浓度及相应温度条件下反应1小时即可降解1μg已纯化好的DNA。如果加入更多的酶，则可相应缩短反应 |
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大肠杆菌感受态细胞的制备和转化
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日期：2006-11-23 16:15:58
点击：175 评论：0
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| 第一节概述 在自然条件下,很多质粒都可通过细菌接合作用转移到新的宿主内,但在人工构建的质粒载体中,一般缺乏此种转移所必需的mob基因,因此不能自行完成从一个细胞到另一个细胞的接合转移。如需将质粒载体转移进受体细菌，需诱导受体细菌产生一种短暂的感受态以摄取外 |
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RFLP和RAPD技术
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日期：2006-11-23 16:15:37
点击：74 评论：0
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| 第一节概述 DNA分子水平上的多态性检测技术是进行基因组研究的基矗RFLP(RestrictionFragmentLengthPolymorphism,限制片段长度多态性)已被广泛用于基因组遗传图谱构建、基因定位以及生物进化和分类的研究。RFLP是根据不同品种（个体）基因组的限制性内切酶的酶切位点碱 |
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测序技术
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日期：2006-11-23 16:14:35
点击：147 评论：0
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| 在分子生物学研究中，DNA的序列分析是进一步研究和改造目的基因的基矗目前用于测序的技术主要有Sanger等（1977）发明的双脱氧链末端终止法和Maxam和Gilbert（1977）发明的化学降解法。这二种方法在原理上差异很大，但都是根据核苷酸在某一固定的点开始，随机在某一个特 |
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肿瘤细胞培养方法简介
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日期：2006-11-23 16:14:02
点击：64 评论：0
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| 一、机械刮除法 1．标记：镜下观察，用不脱色笔在培养瓶皿的背面圈下生长肿瘤细胞的部位。 2．刮除：弃掉培养液，把无菌胶刮伸入瓶皿中，肉眼或显微镜窥视下，刮除无标记空间。 3．用Hanks液冲洗一两次，洗除被刮掉的细胞。 4．注入培养液继续培养，如发现仍有成纤维细 |
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激光显微细胞分离技术
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日期：2006-11-23 16:10:02
点击：54 评论：0
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| 在基础医学研究中涉及越来越多的如某一疾病状态组织中，多种基因或遗传变化，区别发展中的组织细胞群以及疾病状态组织细胞，将有助于了解疾病发生的分子机制。因此，在下一代的分子分析方法将需要进入微观世界及自动化程度高。对某一特殊个体的切片进行遗传指纹图谱鉴 |
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酶分子的改造技术
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日期：2006-11-23 16:08:56
点击：66 评论：0
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| 由于酶具有反应专一性、催化效率高及反应条件温和等优点，因此在工业、农业、医药和环保等方面已经得到越来越多的应用。但总体还没有达到大规模应用的程度，其主要原因在于酶自身性质上的一些不足，如不稳定性、对pH的要求严格以及具有抗原性等等。因此，人们希望通过 |
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昆虫病原真菌的染色及形态观察
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日期：2006-11-23 16:02:09
点击：79 评论：0
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| 一、目的要求： 昆虫病原微生物——真菌病害的鉴定主要是根据症状和病原真菌的形态，因此要确定其是否是致病真菌，其鉴定应以病原真菌的形态为依据。鉴定真菌的方法主要是显微镜检查。 本实验学习鉴定真菌的常规方法，提高识别昆虫病原真菌的能力。要求观察菌丝体和其他 |
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昆虫病原微生物——细菌染色技术及形态观察
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日期：2006-11-23 15:52:22
点击：78 评论：0
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| 目的要求： 昆虫病原微生物的鉴定是昆虫病理学研究的重要范畴，是微生物防治害虫中不可疏忽的步骤。对昆虫传染病的认识和致病原因的确定均取决于对病原微生物的正确鉴定，而且直接关系到病原体的生产、剂型和使用。 本实验要求通过显微镜检查和细菌学上的几个鉴别染色 |
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