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受体菌感受态细胞 competent cell 的制备
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日期:2007-12-18 09:14:52
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| 受体菌感受态细胞的制备 一、目的与原理 当细菌处于容易吸收外源DNA的状态时,即为感受态,而用理化手段使细菌处于感受态的操作为致敏过程。感受态细胞制备是重组基因能否实现转化的一个重要的技术环节。本试验是通过钙离子来诱导使之成为感受态细胞。 二、材料和方法 1 |
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recombinant DNA 重组片段的转化及克隆和筛选
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日期:2007-12-18 09:11:46
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| 重组片段的转化及克隆和筛选 一、目的与原理 转化是指以质粒DNA或以它为载体构建的重组子导入细菌的过程。转化技术在基因工程领域中占有极重要的地位。目前用得较多的转化技术为将人工构建的重组质粒到如受体细胞,使重组质粒在受体细胞中稳定地复制和表达。 二、材料和 |
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Lysozyme 溶菌酶功能及特点
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日期:2007-12-18 09:04:20
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| * 溶菌酶能够溶解细菌细胞壁,破坏细胞壁中的N-乙酰胞壁酸和N-乙酰氨基葡糖之间的β-1,4糖苷键,使细胞壁不溶性黏多糖分解成可溶性糖肽,导致细胞壁破裂内容物逸出而使细菌溶解。阻碍致病细菌的活性繁殖,并杀死致病菌。 * 安全高效的广谱抗菌剂,对大肠杆菌、葡萄球菌 |
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免疫组化非特异性背景染色及其控制方法
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日期:2007-11-07 01:02:03
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| 一、 非特异性染色的识别常出现在组织边缘、胶原纤维及血浆渗出处,坏死组织及固定不良的组织中心处。表现为弥漫性,均匀性的背景染色。也可以是随机分布的阳性反应产物点、团或块状。 二、非特异性染色的原因1. Ig与Fc受体结合 多见于冰冻切片(特别是淋巴造血组织,淋 |
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ELISA基础知识
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日期:2007-10-31 12:25:39
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| ELISA原理与分类 1. ELISA的原理 ELISA 的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗 |
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ELISA操作要点
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日期:2007-10-31 12:23:55
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| 1 标本的采取和保存 可用作 ELISA测定的标本十分广泛,体液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、粪便)等均可作标本以测定其中某种抗体或抗原成份。有些标本可直接进行测定(如血清、尿液),有些则需经预处理(如粪便和某些分泌物)。大部分ELISA检测均以血 |
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ELISA常见问题及解决办法
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日期:2007-10-31 12:18:14
点击:105 评论:0
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| ELISA试验以灵敏度较高、特异性较好的特点在临床上得到了广泛的应用,但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大,如不注意,有可能导致显色不全、花板等结果。我将操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下,以期给同行带来一些启发,提高试验质量。 操作步 |
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ELISA实验指南
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日期:2007-10-31 12:15:41
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| ELISA是酶联接免疫吸附剂测定( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的简称。它是继免疫荧光和放射免疫技术之后发展起来的一种免疫酶技术。此项技术自70年代初问世以来,发展十分迅速,目前已被广泛用于生物学和医学科学的许多领域。 (一) 原理 ELISA是以免疫学反应为 |
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ELISA试剂的临床质量评价
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日期:2007-10-31 12:14:11
点击:78 评论:0
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| ELISA试剂的评价(evaluation)分两个方面:一是试剂本身的质量评价,符合一定 要求后才能生产供应;一是在临床应用中效果的评价。以肝炎ELISA诊断试剂为例,首 先必须通过中国药品生物制品检定,以得到生产的许可。检定内容除包装、标签、说明 书等外,对试剂的性能, |
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ELISA的类型
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日期:2007-10-31 12:12:19
点击:86 评论:0
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| 1. ELISA的原理 ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的 抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的 活性。在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反 应 |
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ELISA的试剂配方
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日期:2007-10-31 12:11:09
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| 在临床检验中一般采用商品试剂盒进行测定。前文(2.2)已述,ELISA中有三个必要 的试剂:免疫吸附剂、结合物和酶的底物。 完整的ELISA试剂盒包含以下各组分: (1)已包被抗原或抗体的固相载体(免疫吸附剂); (2)酶标记的抗原或抗体(结合物); (3)酶的底物; ( |
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ELISA中常见问题及解决方法
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日期:2007-10-31 12:09:31
点击:100 评论:0
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| ELISA试验以灵敏度较高、特异性较好的特点在临床上得到了广泛的应用,但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大,如不注意,有可能导致显色不全、花板等结果。我将操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下,以期给同行带来一些启发,提高试验质量。 下面 |
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细胞ELISA操作步骤
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日期:2007-10-31 12:08:27
点击:189 评论:0
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| Cellular ELISA Protocol Formalin Fixed Cell Plates 1. Trypsinize confluent flasks 2. Pool and count cells 3. Centrifuge at 1500 rpm for 10 minutes 4. Resuspend to the appropriate concentration in complete medium 4 x 105 cells/ml for epithelial cells |
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ELISA原理
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日期:2007-10-31 12:05:02
点击:293 评论:0
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| 基本原理 1971年Engvall和Perlmann发表了酶联免疫吸附剂测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)用于IgG定量测定的文章,使得1966年开始用于抗原定位的酶标抗体技术发展成液体标本中微量物质的测定方法。这一方法的基本原理是:①使抗原或抗体结合到某种固相 |
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免疫酶细胞化学实验技术
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日期:2007-10-23 09:38:40
点击:139 评论:0
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| 免疫酶细胞化学 免疫酶细胞化学是免疫细胞化学(Immunocytochemistry,ICC)中最常用的方法之一,它是在抗原抗体特异反应存在的前提条件下,借助于酶细胞化学的手段,检测某种物质(抗原/抗体)在组织细胞内存在部位的一门新技术:即预先将抗体与酶连结,再使其与组织内 |
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